發(fā)布時(shí)間：2023-02-21 06:18:55
序言：寫(xiě)作是分享個(gè)人見(jiàn)解和探索未知領(lǐng)域的橋梁，我們?yōu)槟x了8篇的高一數(shù)學(xué)學(xué)習(xí)計(jì)劃樣本，期待這些樣本能夠?yàn)槟峁┴S富的參考和啟發(fā)，請(qǐng)盡情閱讀。
【摘 要】學(xué)習(xí)高中數(shù)學(xué)，會(huì)有好些學(xué)困生，學(xué)困生產(chǎn)生的原因是什么？作為我們一線數(shù)學(xué)教師，對(duì)這些學(xué)生考生又如何轉(zhuǎn)化呢？針對(duì)以上兩個(gè)問(wèn)題，本文主要略談筆者對(duì)以上兩個(gè)問(wèn)題的幾點(diǎn)看法。
關(guān)鍵詞 學(xué)困生；轉(zhuǎn)化建議
1.高中數(shù)學(xué)學(xué)困生的成因分析
1.1學(xué)習(xí)數(shù)學(xué)的意志、情感脆弱。好些高中數(shù)學(xué)學(xué)困生數(shù)學(xué)成績(jī)不大理想的原因其實(shí)并不是他們的智力不好，而主要這些學(xué)生缺乏自覺(jué)意識(shí)和頑強(qiáng)的意志，缺乏學(xué)好數(shù)學(xué)的毅力和勇氣，具體表現(xiàn)在:思想上，對(duì)待學(xué)習(xí)目的不明確、態(tài)度不夠端正，認(rèn)為學(xué)習(xí)的目的是為了應(yīng)付親人或應(yīng)付老師的期盼和要求；意志、情感上，由于他們害怕困難、害怕挫折，因此害怕學(xué)習(xí)，不愿花精力和時(shí)間去啃稍難的題目，寧愿做一個(gè)學(xué)習(xí)上的懦夫；行為上，課前課后，從來(lái)不預(yù)習(xí)、復(fù)習(xí)課本內(nèi)容，學(xué)習(xí)數(shù)學(xué)常?！叭齑螋~(yú)，兩天曬網(wǎng)”，不能堅(jiān)持不懈，課堂上，老是希望老師直接將數(shù)學(xué)知識(shí)傳授給自己，自己不愿意主動(dòng)去思考問(wèn)題、分析問(wèn)題、解決問(wèn)題，學(xué)習(xí)數(shù)學(xué)對(duì)老師的依賴(lài)性較強(qiáng)。
1.2學(xué)習(xí)思維問(wèn)題。嚴(yán)密的邏輯性、概括性和很抽象等是高中數(shù)學(xué)最主要的特點(diǎn)。高中數(shù)學(xué)學(xué)困生的思維主要有以下幾個(gè)特點(diǎn)：數(shù)學(xué)問(wèn)題考慮的不透，即只能看到事物的表面現(xiàn)象，看不到事物的本質(zhì)；不會(huì)讀題、不會(huì)挖掘數(shù)學(xué)題目的隱含條件、不會(huì)靈活運(yùn)用數(shù)學(xué)公式，只會(huì)死記硬背一些概念、公式、定理、定律等；思維較遲鈍、呆板，相同的題目，優(yōu)等生往往能舉一反三，觸類(lèi)旁通，能較快的回憶起相關(guān)知識(shí)點(diǎn)，而學(xué)困生即使會(huì)也只是就題論題，做不到相應(yīng)的聯(lián)想和靈活的變通，多數(shù)時(shí)候是漏洞百出、顧此失彼，正因?yàn)槿绱?，學(xué)困生往往學(xué)習(xí)數(shù)學(xué)時(shí)，思維缺少靈活性、創(chuàng)造性。
1.3學(xué)習(xí)方法問(wèn)題。部分?jǐn)?shù)學(xué)學(xué)困生也不是學(xué)習(xí)不認(rèn)真、不努力，他們中也有好些人學(xué)習(xí)非?？炭?，甚至“爭(zhēng)分奪秒、秉燭夜讀”，但是數(shù)學(xué)成績(jī)老是不突出，總結(jié)其主要原因是這些同學(xué)沒(méi)有科學(xué)的學(xué)習(xí)方法。他們往往課前不會(huì)預(yù)習(xí)教材，課堂上不會(huì)聽(tīng)講、不會(huì)思考，不會(huì)抓住知識(shí)重點(diǎn)、難點(diǎn)，課后又不會(huì)如何復(fù)習(xí)，對(duì)于老師講解的知識(shí)只會(huì)機(jī)械的記憶，不去理解、感悟。因此，學(xué)習(xí)方法的不科學(xué)也造成他們學(xué)習(xí)數(shù)學(xué)困難。
1.4家長(zhǎng)、教師問(wèn)題。由于受高考升學(xué)的壓力，無(wú)論是教師還是家長(zhǎng)對(duì)學(xué)生的期望都很高，把學(xué)生的成績(jī)都看的很重，數(shù)學(xué)學(xué)困生的基礎(chǔ)原本就差，他們知識(shí)結(jié)構(gòu)也不夠完整，他們的思維也不可能在短時(shí)間內(nèi)都達(dá)到較高的水平，他們?cè)谙鄬?duì)較短的時(shí)間內(nèi)不可能完全掌握所學(xué)的知識(shí)并加以應(yīng)用，這些都是客觀情況，可是不少老師和家長(zhǎng)，往往硬是給他們和優(yōu)等生提出相同的要求，要求他們和優(yōu)等生在相同的時(shí)間內(nèi)要消化和吸收相同的知識(shí)，把他們?cè)诙虝r(shí)間內(nèi)的成績(jī)和優(yōu)等生的成績(jī)進(jìn)行對(duì)比分析，這無(wú)疑脫離了這些學(xué)生的實(shí)際，無(wú)形中加大這些學(xué)生的心理承受能力，其結(jié)果是成績(jī)不但沒(méi)有提高，反而使他們害怕老師、害怕家長(zhǎng)、害怕學(xué)習(xí)數(shù)學(xué)，甚至有時(shí)，他們?yōu)榱藵M足自己的虛榮心和達(dá)到家長(zhǎng)和老師的要求，考試時(shí)作弊，一旦發(fā)現(xiàn)后又要遭到他人痛斥，甚至學(xué)校處分，其結(jié)果一般只能導(dǎo)致心情壓抑，產(chǎn)生自卑心理，從而缺乏自信，最終選擇自暴自棄、放棄數(shù)學(xué)的學(xué)習(xí)、甚至學(xué)業(yè)。
2高中數(shù)學(xué)學(xué)困生的轉(zhuǎn)化建議
2.1讓學(xué)困生體驗(yàn)成功，激發(fā)他們學(xué)習(xí)數(shù)學(xué)的興趣。成功是一種精神享受，更是激勵(lì)人上進(jìn)的助推劑，優(yōu)等生需要成功，學(xué)困生更需要成功。高中數(shù)學(xué)教學(xué)中，作為教師應(yīng)盡可能地為學(xué)困生提供更多的成功的機(jī)會(huì)，讓學(xué)困生體驗(yàn)成功，體驗(yàn)成功的，例如教師備課時(shí)，要設(shè)計(jì)優(yōu)等生回答的難問(wèn)題，也要設(shè)計(jì)學(xué)困生回答的容易問(wèn)題，使優(yōu)等生有所收獲，也要使學(xué)困生體會(huì)到成功和進(jìn)步，若有些學(xué)困生還是把問(wèn)題答錯(cuò)了，這是應(yīng)加以引導(dǎo)，引導(dǎo)其糾正錯(cuò)誤，切不可大加指責(zé)、批評(píng)，這樣會(huì)逐步使學(xué)困生嘗試到成功的甜頭；還比如，在平時(shí)的考試中出題時(shí)應(yīng)出些盡量簡(jiǎn)單些的數(shù)學(xué)題目，讓學(xué)困生也能在考試中獲得較高的成績(jī)，以培養(yǎng)學(xué)習(xí)數(shù)學(xué)的興趣，使他們意識(shí)到自己行，自己也能學(xué)好數(shù)學(xué)；考試結(jié)束后，教師應(yīng)仔細(xì)分析學(xué)困生的試卷，不但要找錯(cuò)誤所在，還要找答題時(shí)的閃光點(diǎn)，對(duì)簡(jiǎn)單的錯(cuò)題應(yīng)要求他們要及時(shí)糾正，有些錯(cuò)題還得教師輔導(dǎo)，對(duì)閃光點(diǎn)有時(shí)還應(yīng)贊揚(yáng)，這樣做的目的是，使學(xué)困生通過(guò)刻苦學(xué)習(xí)也有獲得高分的機(jī)會(huì)，讓他們有成就感，逐步改變他們的數(shù)學(xué)學(xué)習(xí)成績(jī)真是比別人差一等的局面和印象，從而提高他們學(xué)習(xí)數(shù)學(xué)的興趣和自信心，激勵(lì)他們更加努力，以此達(dá)到徹底轉(zhuǎn)化他們的目的。
2.2讓學(xué)困生得法，提高他們的學(xué)習(xí)學(xué)效率。學(xué)困生的成因是多方面的，其中沒(méi)有科學(xué)的學(xué)習(xí)方法也是一個(gè)主要原因。作為教師應(yīng)根據(jù)不同的學(xué)困生的實(shí)際情況，對(duì)他們分別進(jìn)行學(xué)法指導(dǎo)，指導(dǎo)學(xué)困生課前如何預(yù)習(xí)、課堂上如何聽(tīng)講、如何思考、課后如何完成作業(yè)、如何復(fù)習(xí)等。
2.3保持自己較高的道德修養(yǎng)和提高自身業(yè)務(wù)水平，讓學(xué)困生欽佩你、喜歡數(shù)學(xué)、喜歡數(shù)學(xué)學(xué)習(xí)?！安鸥邽閹?、身正為范”，作為一名教師，不但要有高尚的道德修養(yǎng)，而且還需要較高的才學(xué)水平，只有這樣，學(xué)困生才能從內(nèi)心深處尊重自己，喜歡自己所教的科目，從而為學(xué)生學(xué)好自己所教的科目打下比較堅(jiān)實(shí)的興趣基礎(chǔ)。正因?yàn)槿绱?，作為教師，我們?yīng)不斷鉆研自己的業(yè)務(wù)，應(yīng)不斷提高自己的教學(xué)水平，應(yīng)不斷保持為人師表的良好形象，為學(xué)生起表率作用。
綜上所述，是本人長(zhǎng)期從教以來(lái)，對(duì)高中數(shù)學(xué)學(xué)困生的成因及如何轉(zhuǎn)化的幾點(diǎn)看法。當(dāng)然，數(shù)學(xué)學(xué)困生的轉(zhuǎn)化是有難度的，更不是紙上談兵，我們轉(zhuǎn)化高中數(shù)學(xué)學(xué)困生需要堅(jiān)持、也還需要耐心，筆者終究相信“一分耕耘、一分收獲”。
參考文獻(xiàn)
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[3]孟祥.蘭初中數(shù)學(xué)學(xué)困生成因分析及轉(zhuǎn)化的幾點(diǎn)做法[J].山東教育科研,2001(10).
記憶是思維之鑰的儲(chǔ)倉(cāng)，沒(méi)有記憶，思維就是斷層的，記憶是智慧的母親，沒(méi)有記憶，學(xué)習(xí)就是失敗的.化學(xué)知識(shí)點(diǎn)的繁多讓許多原本喜愛(ài)化學(xué)的高中學(xué)生望而卻步，甚至在高三幾輪復(fù)習(xí)中，因?yàn)榛A(chǔ)知識(shí)、基本規(guī)律的記憶的偏差和缺失而導(dǎo)致解題正確率、速率停滯不前，得分不高從而沮喪抑郁，對(duì)其他學(xué)科的復(fù)習(xí)產(chǎn)生消極影響.但如果學(xué)生可以掌握一些巧妙的記憶方法，將化學(xué)知識(shí)清晰地存儲(chǔ)于腦海中，隨時(shí)隨地快捷地提取，壓力山大的高中生涯將會(huì)輕松一點(diǎn)，勝人一籌.
常見(jiàn)可應(yīng)用于高中化學(xué)知識(shí)體系中的記憶術(shù)有：
一、關(guān)鍵詞記憶法
關(guān)鍵詞是透過(guò)現(xiàn)象看本質(zhì)的鑰匙，是對(duì)廣泛的文字信息的綜攝.通過(guò)對(duì)關(guān)鍵詞的分析，將已有的具體信息進(jìn)行重新構(gòu)思，產(chǎn)生更多的新的構(gòu)思，由此發(fā)現(xiàn)和掌握問(wèn)題的實(shí)質(zhì).一些枯燥的化學(xué)理論、規(guī)律同一幅幅由關(guān)鍵詞串起的畫(huà)面聯(lián)系起來(lái)是記住它們的好辦法.首先，要能夠回憶起理論、規(guī)律中的關(guān)鍵詞，其次要記住這些理論、規(guī)律的適用范圍，全面考慮有無(wú)特例.
比如，電離能和電負(fù)性周期性變化的規(guī)律：同一周期，從左到右，第一電離能呈變大的趨勢(shì)，但價(jià)電子為ns2和ns2np1的元素相比較，由于第ⅢA族的元素原子p軌道上有1個(gè)成單電子，不穩(wěn)定，比第ⅡA族的相鄰元素更容易失去一個(gè)電子，故同周期ⅡA族的元素的第一電離能大于ⅢA族的元素第一電離能.與此類(lèi)似的還有第ⅤA、ⅥA族的元素，第ⅤA的元素p軌道處于半充滿狀態(tài)（ns2np3），屬于穩(wěn)定結(jié)構(gòu)，第一電離能數(shù)值大于相鄰的第ⅥA族的元素；而電負(fù)性，描述的是不同元素的原子對(duì)鍵合電子的吸引力的大小，同一周期，從左到右，電負(fù)性逐漸變大.該規(guī)律圈出關(guān)鍵詞后可簡(jiǎn)化為“三字經(jīng)”言：電離能，看充滿，左到右，趨變大，有特例，或二三，或五六；電負(fù)性，比引力，左到右，漸變大.
利用關(guān)鍵詞進(jìn)行記憶不僅能夠加深對(duì)化學(xué)知識(shí)的理解，還能夠?qū)⑦@種提取關(guān)鍵詞的能力應(yīng)用在對(duì)化學(xué)問(wèn)題的具體分析過(guò)程中，同時(shí)提高自身解決問(wèn)題的能力.
二、聯(lián)想記憶法
聯(lián)想指由于某人或某事物而想起其他相關(guān)的人或事物，是將你想要記住的東西和已知的東西之間形成智力聯(lián)系的過(guò)程，它能夠幫助我們?cè)诰哂心撤N共性或者共同點(diǎn)的人、物體、圖像等之間建立聯(lián)系.在高中化學(xué)知識(shí)體系中，我們習(xí)慣于將化學(xué)物質(zhì)聯(lián)想為枝繁葉茂的大樹(shù)，每一次分類(lèi)就是每一處由小到大、由表及里、由現(xiàn)象到本質(zhì)的系統(tǒng)構(gòu)造；我們將紛繁復(fù)雜的化學(xué)反應(yīng)聯(lián)想為形態(tài)各異的大廈建造，每一種生成物的出現(xiàn)都是微粒樣磚瓦的重塑，演繹著決定和被決定的因果邏輯.對(duì)于抽象的化學(xué)基本概念的記憶，此法較為有用.
例如，記憶氧化還原反應(yīng)中關(guān)于還原劑和氧化劑的概念，到底還原劑失電子化合價(jià)升高，還是氧化劑失電子化合價(jià)升高，常有學(xué)生混淆，此時(shí)介紹聯(lián)想記憶法，會(huì)使概念清晰化，易于辨析.我們嘗試將氧化還原的過(guò)程聯(lián)想成一次好朋友之間贈(zèng)與和接受電子的過(guò)程，初中熟悉的氧化劑是氧氣，那么我們就將氧化劑聯(lián)想成氧氣，氧氣的化合價(jià)為零，只能降低成負(fù)價(jià)，這是氧氣接受了別的物質(zhì)的電子造成的，下次它就要將電子再“還給”其它物質(zhì)，所以生成物叫“還原產(chǎn)物”，這一過(guò)程氧氣被還原，發(fā)生還原反應(yīng)，而還原劑作為贈(zèng)予電子的那一方，也就是把電子還出的那一方，化合價(jià)因?yàn)殡娮拥碾x開(kāi)而升高，下次它就輪到“像氧氣那樣接受電子”，所以產(chǎn)物叫“氧化產(chǎn)物”，這個(gè)[JP3]給出電子的過(guò)程就是還原劑被氧化的過(guò)程，還原劑發(fā)生氧化反應(yīng).[JP]
三、路線記憶法
路線記憶法是將聯(lián)系、位置和想象結(jié)合在一起的一種強(qiáng)大、完整的記憶技巧.首先選擇一個(gè)比較熟悉的地點(diǎn)，比如你的家、學(xué)校、或者公園，用這個(gè)地點(diǎn)構(gòu)思一小段旅行的路線，包含你最為印象深刻的地方，比作站點(diǎn)，每次運(yùn)用這條線路時(shí)只要清空原有路線上的站點(diǎn)的內(nèi)容，重新儲(chǔ)存要記住的新信息；然后按照記憶內(nèi)容的順序安排站點(diǎn)的順序，用這些站點(diǎn)儲(chǔ)存要記住的東西，站點(diǎn)的選擇最好與記憶的內(nèi)容有關(guān)；接著是記憶這條線路，一邊閉上眼睛想象自己在旅行，沿途是自己熟悉的風(fēng)景事物，一邊數(shù)著每個(gè)經(jīng)過(guò)的站點(diǎn)，直至終點(diǎn)站；最后是記憶內(nèi)容，可以配合使用許多手段，比如夸張、色彩、動(dòng)作、味道等等.
熟練掌握氧化還原反應(yīng)中離子得失能力順序是我們熟練解決氧化還原相關(guān)題目的依仗，陽(yáng)離子得電子順序與金屬活動(dòng)性順序相反，比較容易記憶和使用，但是陰離子等的失電子順序（S2->I->Fe2+>Br->Cl->OH-）較難記憶，我們可以嘗試使用位置記憶術(shù).假設(shè)我們學(xué)生高中學(xué)習(xí)期間常往來(lái)的地點(diǎn)有宿舍、食堂、操場(chǎng)、教室，高中學(xué)習(xí)壓力大，大多數(shù)學(xué)生缺乏睡眠，希望留（硫S2-）在宿舍，更聰明一點(diǎn)得去食堂補(bǔ)碘（I-）這個(gè)智慧元素，途經(jīng)操場(chǎng)大門(mén)上欄桿上都可以看到鐵（Fe2+）銹（溴Br-）斑斑，綠（氯Cl-）草茵茵的操場(chǎng).
四、諧音記憶法
利用漢字中同音或近音的條件，用同音或近音的字來(lái)代替本字，產(chǎn)生辭趣.輕松詼諧地句子、故事總使人心情愉悅，短時(shí)間里加強(qiáng)有意注意，大小之余，印象深刻.高中生正處于好奇心旺盛的時(shí)期，對(duì)有趣的事物充滿求知欲，并且勇于模仿和超越.合理利用諧音記憶，不僅可激發(fā)學(xué)生學(xué)習(xí)化學(xué)知識(shí)的熱情，同時(shí)可以在其他學(xué)科的學(xué)習(xí)中、在今后的學(xué)習(xí)中，融會(huì)貫通，繼承和發(fā)揚(yáng)祖國(guó)文化瑰寶.
高一上學(xué)期期末考試已經(jīng)結(jié)束了，高一年級(jí)學(xué)生就要面臨高二的文理分科。高一寒假學(xué)習(xí)計(jì)劃對(duì)自身做個(gè)清晰、理性的分析，確定自身優(yōu)勢(shì)，為學(xué)文、學(xué)理尋找理由就顯得頗為重要。大概方向確定后，就要明確自己所選擇的方向中，哪些學(xué)科要參加高考，哪些只需通過(guò)會(huì)考，從現(xiàn)在起就可以相應(yīng)地制定出針對(duì)不同科目的不同 “用力”方法，將自己高中的時(shí)間、精力做到合理分配。
依常規(guī)來(lái)看，多數(shù)學(xué)生會(huì)選擇學(xué)理——未來(lái)的升學(xué)、就業(yè)面相對(duì)更寬。學(xué)習(xí)理科，數(shù)、理、化就全部是考試科目，而數(shù)理化的難點(diǎn)都在高一。因此，高一寒假必須做的就是把上學(xué)期沒(méi)有學(xué)會(huì)的內(nèi)容學(xué)明白。有一些知識(shí)的掌握是為了以后更好應(yīng)對(duì)相關(guān)知識(shí)點(diǎn)，如果高一就出現(xiàn)漏洞，未來(lái)所有相關(guān)知識(shí)也都會(huì)關(guān)聯(lián)出現(xiàn)問(wèn)題。
值得注意的是，高一的學(xué)習(xí)量很重，很多學(xué)生往往在第一學(xué)期還不太會(huì)調(diào)控。因此，高一學(xué)生第一學(xué)期的功課或多或少都會(huì)有落下的地方，這就需要利用寒假進(jìn)行調(diào)整、提高、填補(bǔ)工作，甚至可以說(shuō)，寒假能否利用好，對(duì)未來(lái)三年的狀態(tài)會(huì)產(chǎn)生重要的影響。
高一寒假學(xué)習(xí)計(jì)劃時(shí)間安排：
7：00 起床
7：20 洗涑完畢之后跑步：繞樓2樓(7：20----8：00)
8：05 吃飯
8：20---8：50 背單詞
8：55---9：25 背課文
9：35---10：35 數(shù)學(xué)
10：45---11：45 英語(yǔ)
11：45---12：00 課外書(shū)
12：00---13：00 午休
13：10---14：10 化學(xué)
14：20---15：10 物理
15：20—16：20 語(yǔ)文
16：20---吃晚飯前 free
關(guān)鍵詞：多媒體技術(shù)；高職高專(zhuān)醫(yī)用化學(xué)；應(yīng)用分析
引言
本著高職高中專(zhuān)醫(yī)用化學(xué)的教學(xué)質(zhì)量提高的目的,在多數(shù)實(shí)體課堂引入多媒體技術(shù)顯得尤為重要,而類(lèi)似Flash這樣的傳統(tǒng)計(jì)算機(jī)多媒體技術(shù)的應(yīng)用更為醫(yī)用化學(xué)的課堂教學(xué)增色不少。
1 醫(yī)用化學(xué)的教學(xué)特點(diǎn)及現(xiàn)狀
傳統(tǒng)的醫(yī)用教育化學(xué)的課程一般課程設(shè)置為一學(xué)年，而從授課形式以及授課效果來(lái)看普遍學(xué)生的課堂積極性較差，大部分源于課堂教學(xué)形式呆板，學(xué)生只能靠死記硬背等形式來(lái)記住一些傳統(tǒng)的知識(shí)點(diǎn)，這樣無(wú)疑給教學(xué)質(zhì)量大打折扣。另外醫(yī)用教學(xué)的內(nèi)容更新又十分迅猛，教師假如不能做到與時(shí)俱進(jìn)，那無(wú)疑就會(huì)對(duì)給課堂的教學(xué)帶來(lái)諸多不便。諸如此類(lèi)的現(xiàn)狀是制約目前醫(yī)用化學(xué)發(fā)展的關(guān)鍵所在，因此引入多媒體技術(shù)來(lái)豐富完善課堂教學(xué)顯得尤為重要。
1.1 醫(yī)用化學(xué)的教學(xué)特點(diǎn)
由于醫(yī)用化學(xué)的教學(xué)中往往需要大量的教學(xué)資源來(lái)輔助授課，因此像標(biāo)本、掛圖以及錄像等傳統(tǒng)的輔助手段缺一不可。但是由于實(shí)體教學(xué)的局限性，學(xué)生無(wú)法在第一時(shí)間了解到最直觀的知識(shí)點(diǎn)，所以傳統(tǒng)醫(yī)用化學(xué)的教學(xué)特點(diǎn)就是分散性與非直觀性，其次就是大面積的重復(fù)知識(shí)點(diǎn)需要大量的PPT演示來(lái)將平面的知識(shí)點(diǎn)生動(dòng)化與立體化，但是往往在沒(méi)有多媒體教學(xué)的引入之前，傳統(tǒng)的教學(xué)太過(guò)于單一化與平面化，這樣學(xué)生往往只能被動(dòng)式的接收信息，所以醫(yī)用化學(xué)的傳統(tǒng)教學(xué)特點(diǎn)第二就是單一化與機(jī)械化。
1.2 醫(yī)用傳統(tǒng)教學(xué)的局限性
醫(yī)用傳統(tǒng)教學(xué)的最大局限性與缺陷在于以下三個(gè)方面：一、教學(xué)內(nèi)容單一，由于以單一的醫(yī)學(xué)化學(xué)如一些藥物化學(xué)反應(yīng)式、酶連反應(yīng)還有人體結(jié)構(gòu)示意圖等比較枯燥的內(nèi)容只是以掛圖或者黑板抄的形式來(lái)展示，無(wú)非是單一而且枯燥。其次第二點(diǎn)是教學(xué)手段單一，雖然課堂的標(biāo)準(zhǔn)化程度得到了一定程度的提高，但是課堂的知識(shí)傳授依然以教授傳授為主，而且多數(shù)停留在信息的單向傳輸階段。第三點(diǎn)是教學(xué)質(zhì)量并不穩(wěn)定。由于傳統(tǒng)的醫(yī)用教學(xué)知識(shí)點(diǎn)眾多，盡管有了相應(yīng)的掛圖以及人工標(biāo)記的指示，但是教學(xué)效果仍然高度依賴(lài)教師質(zhì)量，從而導(dǎo)致教學(xué)品質(zhì)無(wú)法穩(wěn)定的進(jìn)行下去。
2 多媒體技術(shù)在教學(xué)中的實(shí)踐與分析
由于醫(yī)學(xué)課程相對(duì)來(lái)說(shuō)比較枯燥且死板，學(xué)生的學(xué)習(xí)興趣一時(shí)難以激發(fā)。而假如將多媒體技術(shù)應(yīng)用于醫(yī)學(xué)教學(xué)中，會(huì)對(duì)教學(xué)結(jié)構(gòu)與體系乃至教學(xué)思想的改革都起到了促進(jìn)和推動(dòng)的作用。
2.1 多媒體技術(shù)引入的利與弊
首先，多媒體技術(shù)能夠極大的增強(qiáng)學(xué)生的學(xué)習(xí)動(dòng)力，首先其立體的功能可以展現(xiàn)一些化學(xué)物質(zhì)的宏觀和微觀結(jié)構(gòu)。并且當(dāng)一些學(xué)校并不具備完善的實(shí)驗(yàn)條件時(shí)，應(yīng)用多媒體技術(shù)來(lái)演示化學(xué)反應(yīng)進(jìn)程可以使學(xué)生感到生動(dòng)、形象有趣，可以提高學(xué)生的記憶力合學(xué)習(xí)能力。還有一點(diǎn)就是多媒體技術(shù)能夠提高學(xué)生的自學(xué)能力和動(dòng)手能力。因?yàn)閭鹘y(tǒng)的教學(xué)任務(wù)主要是向?qū)W生灌輸知識(shí)，這樣往往不利于學(xué)生終身學(xué)習(xí)的需求。而通過(guò)應(yīng)用多媒體技術(shù)的交互租用則可使學(xué)生與計(jì)算機(jī)進(jìn)行信息交流對(duì)話，大大增強(qiáng)了學(xué)生掌握知識(shí)與技能的能力，并且培養(yǎng)了學(xué)生觀察能力以及縝密的思考能力。但是凡事都存在這對(duì)立面，而多媒體的引入同樣也會(huì)給醫(yī)用教學(xué)帶來(lái)弊端。比如對(duì)于病理學(xué)這門(mén)課程考試而言，多媒體技術(shù)的引入就存在這以下方面的不足。首先內(nèi)容的真實(shí)性尚有欠缺，由于制作幻燈片進(jìn)行考試的畫(huà)面都是平面圖像，這樣的層次感比較差不如事物來(lái)得真實(shí)。
2.2 拓寬多媒體應(yīng)用渠道的必要性
由于社會(huì)發(fā)展以及教育改革的必要性，傳統(tǒng)的教學(xué)以及無(wú)法適應(yīng)如今的課堂教學(xué)，因此在醫(yī)用化學(xué)教學(xué)中引入多媒體渠道是教育改革的趨勢(shì)與要求。而且，從近幾年來(lái)看，一些教研人員也在深化課堂教學(xué)改革以及優(yōu)化教學(xué)結(jié)構(gòu)上做出了很多有益的探索，并且總結(jié)了大量值得推廣的經(jīng)驗(yàn)。這是拓寬多媒體應(yīng)用渠道的必要性一。還有另外的一個(gè)必要性是教改革上的要求。因?yàn)榻處熜枰沾罅控S富的材料來(lái)展示給學(xué)生，而多媒體技術(shù)就可以提供這樣的平臺(tái)，從而可以達(dá)到預(yù)期的效果，并且也能把精心選擇的材料傳遞給學(xué)生，從而增強(qiáng)課堂教學(xué)的實(shí)效性。
3 開(kāi)發(fā)多媒體醫(yī)用化學(xué)教學(xué)軟件的重要性
3.1 Flas軟件圖片的重要性
由于醫(yī)用化學(xué)中的化學(xué)符號(hào)眾多包括大量的化學(xué)結(jié)構(gòu)式以及化學(xué)實(shí)驗(yàn)中用到的各種儀器比如燒杯到分析天平再到高效液相色譜，分光光度計(jì)等。而傳統(tǒng)的教學(xué)根本無(wú)法將這些學(xué)習(xí)內(nèi)容很形象地展示給學(xué)生。假如通過(guò)在PPT或者一些幻燈片上引入Flas軟件，并且能夠通過(guò)數(shù)碼相機(jī)將實(shí)驗(yàn)所記錄的真實(shí)圖片采集下來(lái)，并通過(guò)技術(shù)處理后導(dǎo)入多媒體教學(xué)軟件中。
3.2 ChemOffice在醫(yī)用有機(jī)化學(xué)教學(xué)中的重要性
因?yàn)獒t(yī)用化學(xué)的教學(xué)涉及到很多后續(xù)的課程包括生物化學(xué)、藥理學(xué)還有醫(yī)用生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)等多方面，為了使學(xué)生能在有限的課堂時(shí)間內(nèi)汲取更多的基礎(chǔ)理論知識(shí)，多媒體技術(shù)的應(yīng)用顯得尤為必要。而隨著計(jì)算機(jī)技術(shù)的發(fā)展與深入，假如能開(kāi)發(fā)多種化學(xué)軟件，并將其與多媒體技術(shù)有機(jī)的結(jié)合為一體，那將進(jìn)一步地提高整個(gè)課程的教學(xué)質(zhì)量和教學(xué)效果。例如劍橋軟件公司開(kāi)發(fā)的一款軟件ChemOffice就是基礎(chǔ)地介紹了醫(yī)用有機(jī)化學(xué)的基礎(chǔ)的一面，其功能如下：（1）、可以顯示有機(jī)化合物的三維立體結(jié)構(gòu)，便于學(xué)生從空間上理解復(fù)雜的有機(jī)分子結(jié)構(gòu)，在有機(jī)化學(xué)的教學(xué)中，往往糖類(lèi)的分子結(jié)構(gòu)讓大多數(shù)學(xué)生挺頭疼的，例如糖的開(kāi)鏈結(jié)構(gòu)是如何轉(zhuǎn)變成哈沃斯結(jié)構(gòu)的，該軟件就清晰地展示了比如a-葡萄糖的三維立體結(jié)構(gòu)，便于學(xué)生理解單糖是如何從開(kāi)鏈結(jié)構(gòu)轉(zhuǎn)變?yōu)榄h(huán)狀結(jié)構(gòu)。（2）、可以計(jì)算分子的電荷分布，在學(xué)習(xí)苯環(huán)的取代基的定位效應(yīng)時(shí)候，比如當(dāng)取代基為鹵素的時(shí)候，為鄰對(duì)位效應(yīng)，但又是鈍化集團(tuán)，教材上的一些一些理論可能不太明確，但是假如借助ChemOffice 軟件分子的電荷分布來(lái)說(shuō)明，通過(guò)該軟件的精確計(jì)算，假如苯環(huán)上的電子云密度降低，說(shuō)明鹵素為鈍化基團(tuán)；同時(shí)鄰位與對(duì)位的電子云密度相對(duì)比較高，說(shuō)明鹵素有較高的鄰、對(duì)位效應(yīng)。
3.3 多媒體教學(xué)中加入動(dòng)畫(huà)軟件的重要性
類(lèi)似于Photoshop這樣的動(dòng)畫(huà)編程軟件在醫(yī)用化學(xué)的教學(xué)中顯得必不可少哦，因?yàn)槠渫ǔ？梢詫?duì)象的大小、顏色以及構(gòu)型進(jìn)行相應(yīng)的彩編，然后有助于幫助學(xué)生理解課堂教學(xué)中的一些抽象化的化學(xué)問(wèn)題，并且當(dāng)講解物質(zhì)結(jié)構(gòu)時(shí)候，關(guān)于原子的電子層以及能級(jí)等比較抽象的問(wèn)題時(shí)候，假如能夠制作成多媒體動(dòng)畫(huà)形式并加以演示，那無(wú)疑會(huì)加深了學(xué)生對(duì)整個(gè)系統(tǒng)的理解。
4 結(jié)語(yǔ)
多媒體技術(shù)在高職高專(zhuān)醫(yī)用化學(xué)教學(xué)中的應(yīng)用具有深遠(yuǎn)的意義，首先有助于教師隨時(shí)收集教學(xué)反饋信息，以及學(xué)生發(fā)現(xiàn)自己學(xué)習(xí)的不足，并且更重要的是也能有助于學(xué)生理解相應(yīng)的化學(xué)軟件教程，達(dá)到計(jì)算機(jī)軟件與多媒體技術(shù)有機(jī)的結(jié)合為一體。（雅安職業(yè)技術(shù)學(xué)院醫(yī)學(xué)系；四川；雅安；625000）
參考文獻(xiàn)：
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關(guān)鍵詞： 信息技術(shù)；化學(xué)；實(shí)驗(yàn)；情境；直觀性；互動(dòng)
目前，以現(xiàn)代教育理論和方法為基礎(chǔ)，以系統(tǒng)論的觀點(diǎn)為指導(dǎo)，以信息技術(shù)為核心的現(xiàn)代教育技術(shù)的運(yùn)用，已成為我國(guó)面向21世紀(jì)基礎(chǔ)教育教學(xué)改革的新視點(diǎn)，信息技術(shù)與課堂教學(xué)有機(jī)統(tǒng)一的研究也因此成為教學(xué)科研的重點(diǎn)。在建構(gòu)主義理論指導(dǎo)下，信息技術(shù)為高中化學(xué)教學(xué)提供了良好的學(xué)習(xí)環(huán)境，使學(xué)生的主體地位得以真正確立，使自主學(xué)習(xí)、探索學(xué)習(xí)、協(xié)作學(xué)習(xí)得以真正實(shí)現(xiàn)，使終身教育和學(xué)習(xí)社會(huì)化成為可能，極大地激發(fā)了學(xué)生的學(xué)習(xí)動(dòng)機(jī)，培養(yǎng)了創(chuàng)新精神和實(shí)踐能力。信息技術(shù)與高中化學(xué)課程的整合不能停留在工具層面上，應(yīng)深入探究教學(xué)設(shè)計(jì)、教學(xué)策略，以形成教學(xué)模式，應(yīng)結(jié)合教學(xué)理論和實(shí)踐，以推進(jìn)化學(xué)教學(xué)的徹底變革。
一、利用信息技術(shù)有利于優(yōu)化實(shí)驗(yàn)教學(xué)
以實(shí)驗(yàn)為基礎(chǔ)是化學(xué)學(xué)科的重要特征之一。教師的演示實(shí)驗(yàn)和學(xué)生的分組實(shí)驗(yàn)在教學(xué)中扮演相當(dāng)重要的角色。遺憾的是在實(shí)際教學(xué)中，很多實(shí)驗(yàn)不能現(xiàn)場(chǎng)操作。這樣不但會(huì)使某些教學(xué)內(nèi)容抽象、枯燥、說(shuō)服力不強(qiáng)，而且還造成學(xué)生難以理解，達(dá)不到較好的課堂效果。此時(shí)，如果恰當(dāng)?shù)貙⑿畔⒓夹g(shù)運(yùn)用到課堂教學(xué)之中，會(huì)彌補(bǔ)這一缺憾，收到意想不到的效果，從而順利實(shí)現(xiàn)教學(xué)目的。如，在教學(xué)中如果遇到帶有危險(xiǎn)性的實(shí)驗(yàn)，污染嚴(yán)重的實(shí)驗(yàn)和現(xiàn)象不太明顯的實(shí)驗(yàn)，我們可以充分利用教材中的插圖、圖解、文字等內(nèi)容，用計(jì)算機(jī)將其進(jìn)行重新編輯，同時(shí)加入動(dòng)畫(huà)和聲音。這樣，學(xué)生的興趣就可以大大提高了。又如，在講化學(xué)實(shí)驗(yàn)中的一些錯(cuò)誤操作時(shí)，如果只靠老師講其錯(cuò)誤的原因以及可能帶來(lái)的危害，常常會(huì)使學(xué)生半信半疑。這時(shí)我用計(jì)算機(jī)模擬這些錯(cuò)誤操作并通過(guò)放慢動(dòng)作將其步驟分解。例如，稀釋濃硫酸時(shí)將水倒入濃硫酸中，液體沸騰飛濺；給固體加熱制備氣體時(shí)，試管口向上傾斜，加熱產(chǎn)生的水倒流至試管底部造成試管破裂；當(dāng)加熱液體超過(guò)三分之一的試管且試管口朝著人時(shí)，液體沖出管外且灼傷人等都可用動(dòng)畫(huà)來(lái)完成。學(xué)生看到錯(cuò)誤操作的危害性，印象深刻并加深了對(duì)錯(cuò)誤原因的理解。在這樣的課堂上，學(xué)生興趣十足，自然愿意參與進(jìn)來(lái)，從而成為課堂的主人。
二、利用信息技術(shù)有利于創(chuàng)設(shè)問(wèn)題情境
信息技術(shù)能夠向?qū)W生提供多種信息處理能力和多種刺激的信息，如語(yǔ)言、文字、圖像、動(dòng)畫(huà)、聲音等。學(xué)生可以通過(guò)多種感官獲取豐富的信息，有利于學(xué)生的記憶力和想象力的提高，對(duì)學(xué)生的吸引力也很大。因此，信息技術(shù)具有其它教學(xué)手段所不可比擬的優(yōu)勢(shì)。如，化學(xué)某些科普性的視頻，某些化工生產(chǎn)流程、環(huán)境污染的介紹、各種礦產(chǎn)資源、海洋資源的介紹的視頻。通過(guò)這些視頻的展示既可以使化學(xué)教學(xué)理論聯(lián)系實(shí)際生產(chǎn)、開(kāi)拓學(xué)生視野，又可以增加學(xué)生學(xué)習(xí)化學(xué)的興趣。例如，在“化學(xué)平衡”這節(jié)課時(shí)，我采用三維動(dòng)畫(huà)模擬制作氮分子、氫分子、氨分子達(dá)平衡的動(dòng)畫(huà)過(guò)程，通過(guò)畫(huà)面動(dòng)靜結(jié)合的形式，直觀形象地分析了化學(xué)平衡的動(dòng)、定、變?nèi)筇卣?，通過(guò)使學(xué)生看到化學(xué)鍵的斷裂和重新組合的過(guò)程使較為抽象的概念容易讓學(xué)生理解，便于記憶?？傊畔⒓夹g(shù)形象生動(dòng)，感染力強(qiáng)，能激發(fā)學(xué)生對(duì)學(xué)習(xí)的興趣，從而活躍課堂氣氛，使學(xué)生在興趣盎然的情境下去接受知識(shí)，興高采烈地參與課堂，鞏固了知識(shí)。
三、利用信息技術(shù)有利于化學(xué)直觀性教學(xué)
化學(xué)是研究物質(zhì)的組成、結(jié)構(gòu)、性質(zhì)以及變化規(guī)律的基礎(chǔ)自然科學(xué)。利用信息技術(shù)對(duì)實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象進(jìn)行放大，可以克服演示實(shí)驗(yàn)可見(jiàn)度小的缺陷，使學(xué)生能清楚地觀察到實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象。如《鐵的性質(zhì)》一節(jié) Mg、Zn、Fe、Cu 與 HCl 是否反應(yīng)及反應(yīng)速度的對(duì)比實(shí)驗(yàn)，在實(shí)驗(yàn)時(shí)將儀器放在實(shí)物展示臺(tái)上，用液晶投影機(jī)投影到大屏幕上，根據(jù)是否產(chǎn)生氣泡、反應(yīng)的劇烈程度等現(xiàn)象，推斷金屬的活動(dòng)性順序，這樣做把俯視觀察變?yōu)槠揭曈^察，讓坐在后面的學(xué)生對(duì)實(shí)驗(yàn)中產(chǎn)生的細(xì)微現(xiàn)象仍然看得非常清晰，增強(qiáng)了實(shí)驗(yàn)的可視性及真實(shí)可信性。教師充分利用投影手段克服實(shí)驗(yàn)器材的局限，輔助教學(xué)，引導(dǎo)學(xué)生仔細(xì)觀察、感知，自覺(jué)地進(jìn)行表象活動(dòng)，提高演示效果。又如，在探究電解一些電解質(zhì)溶液的電解產(chǎn)物及溶液的 PH 值變化時(shí)，我利用 flash 軟件設(shè)計(jì)了一個(gè)課件，用一些小球來(lái)模擬溶液中看不見(jiàn)的陰陽(yáng)離子，然后讓學(xué)生分別對(duì)電解氯化鈉溶液，氫氧化鈉溶液，硫酸銅溶液和硫酸溶液進(jìn)行模擬分析過(guò)程，探究出電源的陰極和陽(yáng)極產(chǎn)物的規(guī)律和溶液的 PH 值變化規(guī)律。通過(guò)這種方法，使學(xué)生對(duì)理論知識(shí)的學(xué)習(xí)不再覺(jué)得困難，相反卻產(chǎn)生了很大的興趣，非常愿意去嘗試學(xué)習(xí)。真的是變被動(dòng)為主動(dòng)了。
四、利用信息技術(shù)有利于實(shí)現(xiàn)互動(dòng)性教學(xué)
【關(guān)鍵詞】 nf-κb；核糖核酸類(lèi)，反義；肌細(xì)胞，平滑肌
effect of antisense rna of nf-κb on proliferation of vascular smooth muscle cells in spontaneously hypertensive rats/hu rong，hong huashan，xu changsheng，wu kegui//chinese journal of cardiovascular rehabilitation medicine,2009,18(2):116
abstract：objective:to investigate the effect of antisense rna of nf-κb on proliferation of vascular smooth muscle cells（vsmcs） in spontaneously hypertensive rats（shr） promoted by thrombin.methods:after pretreated with the 50moi recombinant adenovirus expressing antisense rna of nf-κb for 48h and 100μmol/l pdtc （nf-κb special inhibitor）for 1h， vsmcs proliferation induced by 0.5u/ml thrombin was investigated.the proliferation rate of vsmcs was determined with both wst-1 metabolic activity and 3h-tdr incorporation efficiency.results:the pretreatment of recombinant adenovirus expressing nf-κ b antisense rna obviously inhibit vsmcs proliferation induced by thrombin (p<0.01) at the rate of >30%, which was similar to the inhibition of vsmcs proliferation by nf- κ b special inhibitor pdtc with no statistical difference between two group(p>0.05).conclusion:the recombinant adenovirus expressing nf-κ b antisense rna may effectively inhibit vsmcs proliferation induced by thrombin,is similar to the nf- κb special inhibitor,may be applied to successive basic research and clinical interference treatment.
author′s address：department of cardiology，union hospital，fujian medical university，fuzhou，fujian，350001,china
key words：nf-kappa b;ribonueleases,antisense; myocytes,smooth muscle
血管平滑肌細(xì)胞（vsmcs）的增殖、向內(nèi)膜下遷移、分泌細(xì)胞外基質(zhì)等在血管增殖性疾病的發(fā)病中起重要作用。體內(nèi)可以引起細(xì)胞增殖的因素很多，各種有絲分裂原可通過(guò)不同的信號(hào)傳導(dǎo)系統(tǒng)產(chǎn)生細(xì)胞增殖反應(yīng)，單純抑制某種特定的因子并不能完全抑制病灶形成。因此，阻斷調(diào)節(jié)細(xì)胞增殖、分化、遷移等最終共同通路的關(guān)鍵基因成為有效防止血管增殖性疾病的研究方向。核因子-κb（nf-κb）是調(diào)節(jié)細(xì)胞基因轉(zhuǎn)錄的關(guān)鍵因子之一，調(diào)控幾十種生長(zhǎng)因子、細(xì)胞因子、粘附因子、趨化因子等靶基因的表達(dá)[1]。因此，許多學(xué)者認(rèn)為調(diào)控nf-κb的活性是一個(gè)理想的治療靶點(diǎn)?；蛑委熓菑幕蛩礁淖兗?xì)胞的病理狀態(tài)而達(dá)到治愈疾病的目的，具有一次治療長(zhǎng)期有效的優(yōu)點(diǎn)，克服現(xiàn)有藥物療法的缺點(diǎn)，實(shí)現(xiàn)“生理性治療”[2]。反義rna是一類(lèi)能與特異性mrna互補(bǔ)的小分子質(zhì)量的、可擴(kuò)散的dna轉(zhuǎn)錄物，它能夠從翻譯水平、轉(zhuǎn)錄水平和核酸復(fù)制水平上高度特異性地抑制靶基因表達(dá)。反義核酸技術(shù)的意義在于僅干擾靶基因功能，對(duì)基因組其它基因的結(jié)構(gòu)無(wú)影響，而且方法簡(jiǎn)便。本研究試圖在細(xì)胞水平探討以腺病毒為載體，nf-κb反義核酸治療對(duì)vsmc增殖的影響，為其在整體動(dòng)物的水平治療經(jīng)皮冠狀動(dòng)脈介入治療（pci）術(shù)后再狹窄和動(dòng)脈粥樣硬化（as）奠定基礎(chǔ)。
1 資料與方法
1.1 一般資料
實(shí)驗(yàn)所用的自發(fā)性高血壓大鼠（shr）購(gòu)自北京維通利華有限公司［二級(jí)動(dòng)物合格證號(hào)：scxk(京)2003-0003］。表達(dá)nf-κb反義rna重組腺病毒載體－pad/cmv/269和空載體pad/cmv系本實(shí)驗(yàn)室構(gòu)建保存[3]；凝血酶、吡咯烷二硫氨基甲酸鹽（pdtc）（sigma公司）1；氚-胸腺嘧啶核苷（3h-tdr，中國(guó)原子能科學(xué)研究院）；測(cè)定細(xì)胞活性的wst-1試劑盒（德國(guó)boehringer mannheim公司）；陽(yáng)離子脂質(zhì)體（lipofectamine）tm 2000轉(zhuǎn)染試劑（invitrogen公司）。
1.2 實(shí)驗(yàn)方法
1.2.1 vsmcs的培養(yǎng)與鑒定[4]:以組織貼塊法培養(yǎng)vsmcs。取清潔級(jí)三月齡雄性shr大鼠，無(wú)菌操作分離其胸主動(dòng)脈，剪碎后加入含15%胎牛血清（fbs）的dmem培養(yǎng)液（含100 ku/l青霉素，100mg/l鏈霉素），5%co2、37℃二氧化碳培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)選用3～5代細(xì)胞。用光鏡和免疫細(xì)胞化學(xué)法鑒定。
1.2.2 重組腺病毒的制備、滴度測(cè)定及鑒定[3]:paci酶切使重組腺病毒質(zhì)粒pad/cmv/269線性化，紫外分光光度計(jì)測(cè)定質(zhì)粒的純度及濃度。按lipofectaminetm 2000轉(zhuǎn)染試劑盒操作說(shuō)明，用脂質(zhì)法轉(zhuǎn)染培養(yǎng)好的293單層細(xì)胞，進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)包裝，形成并釋放完整的腺病毒顆粒。包裝后的腺病毒用空斑法測(cè)定滴度，操作按virapowertm adenoviral expression system 試劑盒說(shuō)明書(shū)。重組腺病毒用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（pcr）方法進(jìn)行驗(yàn)證，按dna提取試劑盒操作說(shuō)明。
1.2.3 實(shí)驗(yàn)分組:實(shí)驗(yàn)選用3-5代的培養(yǎng)vsmcs，用0.125％胰酶消化后，以2×104個(gè)/孔或5×103個(gè)/孔，均勻接種于24孔或96孔培養(yǎng)板上，待細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)至70%～80％匯合時(shí)，吸棄原培養(yǎng)液，換用無(wú)血清或0.2％血清的dmem培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)24h，使vsmcs處于g0/g1期，再進(jìn)行后續(xù)干預(yù)實(shí)驗(yàn)。將培養(yǎng)細(xì)胞分為5組：①空白對(duì)照組：加入無(wú)血清dmem液；②空載體組：加入50多重感染（moi） ad/cmv感染vsmcs；③凝血酶組：加入終濃度為0.5u/ml凝血酶；④pdtc組：先加入終濃度為100μmol/l的pdtc預(yù)處理1h，再加入終濃度為0.5u/ml凝血酶；⑤反義rna預(yù)處理組：先加入50moi 重組ad/cmv/269感染vsmcs后48h，再加入終濃度為0.5u/ml凝血酶。按實(shí)驗(yàn)要求細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)至加刺激因素凝血酶后24h，測(cè)定細(xì)胞增殖率。每組復(fù)3孔取均值。重復(fù)4次。
1.2.4 vsmcs增殖的測(cè)定方法:wst-1代謝活性測(cè)定[4]：取3～5代vsmcs以5×103個(gè)/孔均勻接種于96孔培養(yǎng)板上，培養(yǎng)至70%～80％匯合時(shí)，換用0.2％血清的dmem培養(yǎng)液，繼續(xù)培養(yǎng)24h，使vsmcs處于g0/g1期。在上述各干預(yù)因素刺激至規(guī)定時(shí)間后加入即用型wst-1溶液，10μl/孔，繼續(xù)置37℃ 5％co2培養(yǎng)箱孵育90 min。取出培養(yǎng)板，置振蕩器上充分振蕩（300 r/min）1min，在酶標(biāo)儀450/630nm雙波長(zhǎng)處檢測(cè)光密度（od）值，即wst-1檢測(cè)值。每次實(shí)驗(yàn)均設(shè)一個(gè)（復(fù)3孔）空白對(duì)照孔（以dmem培養(yǎng)液代替細(xì)胞），對(duì)照孔吸光值應(yīng)<0.01。dna合成率測(cè)定：3～5代vsmcs以2×104個(gè)/孔，均勻接種于24孔培養(yǎng)板上，在上述干預(yù)因素加入時(shí)，同時(shí)加入1微居里/ml的3h-tdr，共育至相應(yīng)時(shí)間后，吸棄培養(yǎng)液，0.125％胰酶消化細(xì)胞，收集細(xì)胞于0.45μm的微孔濾膜（預(yù)先用10％三氯醋酸濕潤(rùn)）上，負(fù)壓抽濾，用生理鹽水和10％三氯醋酸沖洗濾膜，室溫涼干后置入液體閃爍杯中，加入3ml閃爍液［二甲苯+0.5%二苯基噁唑（ppo）+0.04%對(duì)苯撐苯唑基（popop）］，靜置過(guò)夜后，在液體閃爍計(jì)數(shù)器上進(jìn)行放射性強(qiáng)度的測(cè)定。
1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
實(shí)驗(yàn)結(jié)果用數(shù)據(jù)和圖表表示，測(cè)定值以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)。采用spss 10.0統(tǒng)計(jì)軟件包分析。組間比較采用多樣本均數(shù)的單因素方差分析檢驗(yàn)。p<0.05為差異有顯著性。
2 結(jié) 果
2.1 nf-κb反義rna重組腺病毒感染vsmcs對(duì)vsmc wst-1代謝活性的影響
凝血酶＋反義rna組和凝血酶＋pdtc組的wst-1的od值均比凝血酶組明顯減少（p<0.01），反義rna組與pdtc組之間不存在顯著差異（p>0.05）。50moi nf-κb反義rna和100μmol/l pdtc對(duì)0.5u/ml凝血酶誘導(dǎo)的vsmc wst-1代謝活性增加的抑制率分別為35.64％和36.32％，較之凝血酶組顯著減少（p<0.01），見(jiàn)表1，圖1。
2.2 nf-κb反義rna重組腺病毒感染vsmcs對(duì)vsmc 3h-tdr摻入率的影響
凝血酶＋反義rna組和凝血酶＋pdtc組的3h-tdr摻入率均比凝血酶組明顯減少（p<0.01），反義rna組與dptc組之間不存在顯著差異（p>0.05）。50moi nf-κb反義rna和100μmol/l pdtc對(duì)0.5u/ml凝血酶誘導(dǎo)vsmc 3h-tdr摻入率增加的抑制率分別為45.22％和49.62％，較之凝血酶組顯著減少（p<0.01），見(jiàn)表1，圖2。表1 不同組wst-1測(cè)定的代謝活性和氚胸腺嘧啶核苷（3h-tdr）摻入率(n=4)
3 討 論
許多能夠抑制vsmc增殖的藥物，無(wú)論是在基礎(chǔ)研究還是臨床實(shí)驗(yàn)中，均已被證明具有防治動(dòng)脈硬化及pci術(shù)后再狹窄的作用。但由于藥物治療的效果尚不十分理想，以及必須堅(jiān)持長(zhǎng)期用藥給病人心理上造成了巨大的困擾，尋找更加有效和方便可靠的治療方法便成為心血管病研究的熱點(diǎn)。盡管基因治療目前尚不十分成熟，但在這一領(lǐng)域中所取得的成就已引起眾多學(xué)者的關(guān)注。
凝血酶是一種重要的血管活性物質(zhì)，除凝血作用外，晚近也證明它還能促進(jìn)vsmc的增殖和遷移；促進(jìn)血管壁非細(xì)胞成分的累積和新生內(nèi)膜形成和釋放炎癥反應(yīng)因子等作用，其功能多由細(xì)胞表面的凝血酶受體基因介導(dǎo)[5]。nf-κb是調(diào)節(jié)細(xì)胞基因轉(zhuǎn)錄的關(guān)鍵因子之一，新近研究發(fā)現(xiàn)vsmc中存在著nf-κb通路，且是vsmc增殖必經(jīng)的激活通路。本系列實(shí)驗(yàn)的先前研究結(jié)果顯示凝血酶能夠激活vsmc的nf-κb，使其從細(xì)胞漿轉(zhuǎn)位至細(xì)胞核，而且凝血酶引起的vsmc增殖與nf-κb途徑相關(guān)聯(lián)[6]。nf-κb可能是vsmc增殖的細(xì)胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的共同通路。國(guó)內(nèi)、外已有利用反義核酸技術(shù)抑制凝血酶受體表達(dá)來(lái)阻斷凝血酶作用，從而抑制vsmc增殖的報(bào)道[7～9]，但利用反義表達(dá)載體、反義核酸技術(shù)抑制nf-κb的生成，從而達(dá)到抑制凝血酶誘導(dǎo)vsmc增殖的目的至今尚未見(jiàn)相關(guān)報(bào)道。
本研究利用前文[3]構(gòu)建的nf-κb反義rna腺病毒表達(dá)載體，轉(zhuǎn)染293細(xì)胞，獲得高滴度腺病毒上清，再感染vsmc，觀察nf-κb反義rna對(duì)凝血酶引起的細(xì)胞增殖的作用。結(jié)果顯示，該載體能在vsmc內(nèi)表達(dá)出nf-κb反義rna，顯著抑制了凝血酶誘導(dǎo)的vsmc增殖，顯示出該反義表達(dá)載體在心血管細(xì)胞增殖性疾病的基因治療的研究中具有良好的適用性。
基因治療是從根本上針對(duì)發(fā)病環(huán)節(jié)的一種治療手段，靶向性更明顯，具有一次治療長(zhǎng)期有效的優(yōu)點(diǎn)。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，在同等條件下，nf-κb反義rna對(duì)vsmc增殖的抑制率＞30％，即具有生物學(xué)效應(yīng)，且與nf-κb特異性阻斷劑pdtc的抑制作用相仿，為今后進(jìn)一步的基礎(chǔ)研究和臨床干預(yù)治療奠定了基礎(chǔ)。值得注意的是，nf-κb在維持機(jī)體的防御功能和細(xì)胞生死平衡方面，起著極其重要的作用，完全地、持續(xù)地阻斷nf-κb激活有可能導(dǎo)致免疫缺陷和正常細(xì)胞的凋亡[10,11]。因此，如何進(jìn)一步提高反義核酸技術(shù)的穩(wěn)定性、有效性、安全性，尚待進(jìn)一步的研究。
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[論文摘要]文章基于高職藝術(shù)設(shè)計(jì)類(lèi)人才培養(yǎng)特點(diǎn)，以南寧職業(yè)技術(shù)學(xué)院“企業(yè)+責(zé)任班”模式構(gòu)建與實(shí)踐為例，探討了在產(chǎn)業(yè)經(jīng)濟(jì)轉(zhuǎn)移背景下，實(shí)現(xiàn)高職藝術(shù)設(shè)計(jì)類(lèi)人才規(guī)?；囵B(yǎng)工學(xué)結(jié)合模式。
[論文關(guān)鍵詞]高職藝術(shù)設(shè)計(jì) 規(guī)?；∪瞬排囵B(yǎng) 工學(xué)結(jié)合 企業(yè)+責(zé)任班
一、問(wèn)題的提出
近幾年，沿海一線城市營(yíng)運(yùn)成本大幅增加，一批企業(yè)從沿海遷往內(nèi)地，產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)移趨勢(shì)已形成。內(nèi)地的裝飾與環(huán)境景觀設(shè)計(jì)、新媒體設(shè)計(jì)、藝術(shù)設(shè)計(jì)類(lèi)等技術(shù)服務(wù)產(chǎn)業(yè)，受到產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)移影響，迎來(lái)了新的機(jī)遇與挑戰(zhàn)：(1)隨著產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)移，內(nèi)地藝術(shù)設(shè)計(jì)類(lèi)等技術(shù)服務(wù)市場(chǎng)活躍；(2)外地企業(yè)帶來(lái)先進(jìn)專(zhuān)業(yè)技術(shù)、規(guī)范的管理理念，促使內(nèi)地市場(chǎng)專(zhuān)業(yè)細(xì)分明顯、市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)加??；(3)基于藝術(shù)設(shè)計(jì)類(lèi)技術(shù)服務(wù)特點(diǎn)，外地企業(yè)需要大量本地技能人才；同時(shí)，本地企業(yè)受產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)移沖擊，對(duì)人才規(guī)格要求發(fā)生變化。
就目前我國(guó)就業(yè)形勢(shì)來(lái)看，高等職業(yè)人才培養(yǎng)規(guī)?；咽谴髣?shì)所趨。而傳統(tǒng)藝術(shù)設(shè)計(jì)類(lèi)專(zhuān)業(yè)人才多是小班培養(yǎng)，辦學(xué)規(guī)模與質(zhì)量的矛盾一直是困擾高職院校的瓶頸。如何乘產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)移東風(fēng)，整合校企資源，探索一條具有專(zhuān)業(yè)和地方特色工學(xué)結(jié)合路子，實(shí)現(xiàn)高職藝術(shù)設(shè)計(jì)類(lèi)人才規(guī)?；A麗轉(zhuǎn)身，是擺在高職教育者面前迫在眉睫的問(wèn)題。本文擬以南寧職業(yè)技術(shù)學(xué)院藝術(shù)設(shè)計(jì)類(lèi)人才培養(yǎng)建設(shè)為例，探討全方位工學(xué)結(jié)合的高職藝術(shù)設(shè)計(jì)類(lèi)規(guī)模化人才培養(yǎng)模式研究與實(shí)踐，與相關(guān)人士商榷。
二、國(guó)內(nèi)外高職人才培養(yǎng)工學(xué)結(jié)合模式研究與實(shí)踐對(duì)比分析
1 基于工學(xué)結(jié)合的人才培養(yǎng)模式研究與實(shí)踐是目前高職教育的重點(diǎn)、難點(diǎn)。目前，進(jìn)一步深化高職教育改革，加強(qiáng)工學(xué)結(jié)合、校企合作是高職教育的關(guān)鍵點(diǎn)。在高職中，工學(xué)結(jié)合人才培養(yǎng)模式主要有以下幾種：(1)“訂單培養(yǎng)”或“訂單教育”。其基本內(nèi)涵是由用人單位提出人才需求標(biāo)準(zhǔn)，校企雙方共同論證確定培養(yǎng)目標(biāo)、課程設(shè)置、教學(xué)計(jì)劃、教學(xué)大綱和教學(xué)進(jìn)度，完成人才培養(yǎng)的任務(wù)。例如“豐田班”“富士通”班等培養(yǎng)形式。(2)階段性“工學(xué)結(jié)合”培養(yǎng)模式。其基本內(nèi)涵是學(xué)生在課堂學(xué)習(xí)基本專(zhuān)業(yè)知識(shí)理論，然后通過(guò)課程實(shí)訓(xùn)、頂崗實(shí)訓(xùn)，學(xué)生走出校園，進(jìn)入職業(yè)崗位實(shí)訓(xùn)。當(dāng)前高職中文、管理等各類(lèi)專(zhuān)業(yè)廣泛應(yīng)用該培養(yǎng)模式，例如“2+1”“2.5+0.5”等培養(yǎng)形式。
其中，“訂單”式合作培養(yǎng)，學(xué)?；菊瞻崞髽I(yè)培訓(xùn)計(jì)劃，企業(yè)將培訓(xùn)中心移植到學(xué)校，校企共建，工學(xué)結(jié)合融合性較好?；诼殬I(yè)崗位特性，當(dāng)前應(yīng)用于汽車(chē)維修、機(jī)電一體化等勞動(dòng)密集型、機(jī)械生產(chǎn)流線化的職業(yè)崗位人才培養(yǎng)，不具有普遍適用性；階段性“工學(xué)結(jié)合”培養(yǎng)模式，職業(yè)崗位應(yīng)用面向廣泛，但該模式中，校內(nèi)外教師、工和學(xué)相對(duì)脫離，校內(nèi)教師對(duì)市場(chǎng)前沿信息把握有相當(dāng)難度，理論和實(shí)訓(xùn)的融合性不高。
2 國(guó)內(nèi)外工學(xué)結(jié)合人才培養(yǎng)模式研究與實(shí)踐對(duì)比分析。發(fā)達(dá)國(guó)家職業(yè)教育中人才培養(yǎng)模式有以職業(yè)技能培訓(xùn)為主體的模式，例如德國(guó)的“雙元制”、澳大利亞的“新學(xué)徒制”、法國(guó)“學(xué)徒培訓(xùn)中心”；還有以職業(yè)素質(zhì)培養(yǎng)為主體的模式，例如新加坡的“教學(xué)工廠”、日本的“企業(yè)教育”、丹麥的“模擬公司”等。
與發(fā)達(dá)國(guó)家相比，我國(guó)高職教育人才培養(yǎng)存在以下不足：(1)我國(guó)工學(xué)結(jié)合人才培養(yǎng)模式支持系統(tǒng)的要素短缺——缺少管理體制、人員結(jié)構(gòu)、教學(xué)制度、課程體系等方面的支撐；(2)政府缺乏對(duì)企業(yè)的激勵(lì)機(jī)制，用人單位合作的積極性不高成為模式實(shí)施的一大障礙；(3)政府沒(méi)有鼓勵(lì)學(xué)校實(shí)施工學(xué)結(jié)合人才培養(yǎng)模式的專(zhuān)項(xiàng)經(jīng)費(fèi)。因此，我國(guó)學(xué)校實(shí)施工學(xué)結(jié)合人才培養(yǎng)模式往往處于完成任務(wù)和勉為其難的被動(dòng)地位。
三、高職藝術(shù)設(shè)計(jì)類(lèi)規(guī)?；瞬排囵B(yǎng)工學(xué)結(jié)合模式探討
1 基于工學(xué)結(jié)合的高職藝術(shù)設(shè)計(jì)類(lèi)規(guī)?；瞬排囵B(yǎng)需要解決的關(guān)鍵問(wèn)題。結(jié)合上節(jié)分析，在我國(guó)現(xiàn)有國(guó)情下，高職藝術(shù)設(shè)計(jì)類(lèi)規(guī)?；瞬排囵B(yǎng)需要解決以下問(wèn)題：(1)校企合作、工學(xué)結(jié)合方面，需要整合利用產(chǎn)業(yè)轉(zhuǎn)移資源，尋找校企合作最佳點(diǎn)，服務(wù)地方經(jīng)濟(jì)；(2)校方辦學(xué)方面，需要突破藝術(shù)設(shè)計(jì)類(lèi)專(zhuān)業(yè)小班培養(yǎng)定式，解決辦學(xué)規(guī)模、辦學(xué)實(shí)訓(xùn)和師資基礎(chǔ)條件與教學(xué)質(zhì)量之間的矛盾。
2 “企業(yè)+責(zé)任班”人才培養(yǎng)工學(xué)結(jié)合模式構(gòu)建。第一，“企業(yè)+責(zé)任班”人才培養(yǎng)工學(xué)結(jié)合模式基本思路。學(xué)校設(shè)立由行業(yè)專(zhuān)家、專(zhuān)業(yè)帶頭人等組成的專(zhuān)業(yè)建設(shè)指導(dǎo)委員會(huì)，并由專(zhuān)業(yè)建設(shè)指導(dǎo)委員會(huì)選擇生產(chǎn)技術(shù)先進(jìn)、管理嚴(yán)格、經(jīng)營(yíng)規(guī)范、社會(huì)聲譽(yù)好，尤其在某一方面的專(zhuān)業(yè)技術(shù)具有專(zhuān)業(yè)核心競(jìng)爭(zhēng)力的企業(yè)合作，根據(jù)企業(yè)需要技能人才的特點(diǎn)，找準(zhǔn)雙方利益共同點(diǎn)，成立教學(xué)責(zé)任班。責(zé)任班以合作企業(yè)的特長(zhǎng)專(zhuān)業(yè)技術(shù)為職業(yè)技能的培養(yǎng)重點(diǎn)，以企業(yè)實(shí)際項(xiàng)目為依托建立合作工作室，由責(zé)任班專(zhuān)業(yè)教師組織，企業(yè)骨干和專(zhuān)家共同建立課程體系、確定課程各階段實(shí)訓(xùn)環(huán)節(jié)、制定評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)等，以實(shí)現(xiàn)“多方位、全過(guò)程”工學(xué)結(jié)合人才培養(yǎng)模式。
第二，“企業(yè)+責(zé)任班”人才培養(yǎng)模式構(gòu)建。以南寧職業(yè)技術(shù)學(xué)院藝術(shù)工程學(xué)院為例，經(jīng)過(guò)多年的高職教育發(fā)展，藝術(shù)工程學(xué)院在近年來(lái)國(guó)家示范院校建設(shè)、精品課程、教學(xué)團(tuán)隊(duì)、國(guó)家名師等方面建設(shè)均取得了較好成績(jī)，由此，帶了專(zhuān)業(yè)品牌效應(yīng)，教學(xué)改革上教改、科研、社會(huì)服務(wù)的成效凸顯，辦學(xué)形式類(lèi)型多樣，藝術(shù)設(shè)計(jì)類(lèi)專(zhuān)業(yè)招生逐年遞增。以國(guó)家精品專(zhuān)業(yè)室內(nèi)設(shè)計(jì)技術(shù)專(zhuān)業(yè)為例，該專(zhuān)業(yè)從2008級(jí)開(kāi)始增加到10個(gè)班。而辦學(xué)規(guī)模的擴(kuò)大，帶來(lái)了實(shí)訓(xùn)設(shè)施、師資等教學(xué)條件方面較大壓力。 轉(zhuǎn)貼于
鑒于上述情形，南寧職業(yè)技術(shù)學(xué)院室內(nèi)設(shè)計(jì)技術(shù)專(zhuān)業(yè)教學(xué)團(tuán)隊(duì)與廣州、香港及本地裝飾龍頭企業(yè)合作建立“企業(yè)+責(zé)任班”，根據(jù)各企業(yè)特質(zhì)，一個(gè)企業(yè)引領(lǐng)一個(gè)專(zhuān)業(yè)拓展方向，把室內(nèi)設(shè)計(jì)技術(shù)專(zhuān)業(yè)方向細(xì)化為設(shè)計(jì)、施工圖、家居飾品、施工等方向，共同建立課程體系、確定課程各階段實(shí)訓(xùn)環(huán)節(jié)、制定課程與專(zhuān)業(yè)評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)等。室內(nèi)設(shè)計(jì)技術(shù)專(zhuān)業(yè)教學(xué)團(tuán)隊(duì)與各合作企業(yè)研討確定出一個(gè)平臺(tái)、多個(gè)方向課程體系，即一年級(jí)為專(zhuān)業(yè)方向相通基礎(chǔ)平臺(tái)課程和由合作企業(yè)指導(dǎo)下專(zhuān)業(yè)方向認(rèn)知實(shí)訓(xùn)；二、三年級(jí)依托不同方向的“企業(yè)+責(zé)任班”載體，既可以“企業(yè)進(jìn)校園”，也可以“學(xué)生出校園”。學(xué)生采取靈活多樣的學(xué)習(xí)形式，以室內(nèi)設(shè)計(jì)技術(shù)專(zhuān)業(yè)崗位培養(yǎng)要求為目標(biāo)，引入行業(yè)、企業(yè)崗位標(biāo)準(zhǔn)，以企業(yè)實(shí)際工程項(xiàng)目為依托，校企共同開(kāi)發(fā)課程，構(gòu)建教學(xué)課程體系?！捌髽I(yè)+責(zé)任班”，以班級(jí)為單位，引進(jìn)企業(yè)管理理念與機(jī)制，對(duì)學(xué)生教學(xué)過(guò)程組織管理、教學(xué)質(zhì)量監(jiān)控；引進(jìn)企業(yè)評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)，建立學(xué)生培養(yǎng)評(píng)估體系，形成學(xué)生自主管理。
3 企業(yè)+責(zé)任班”人才培養(yǎng)模式分析。第一，“企業(yè)+責(zé)任班”模式實(shí)施的前提。應(yīng)該說(shuō)，在中國(guó)現(xiàn)有國(guó)情下，由于政府缺乏對(duì)企業(yè)的激勵(lì)機(jī)制，企業(yè)只是經(jīng)營(yíng)的實(shí)體，學(xué)校才是人才培養(yǎng)的主體，高職院校只有增強(qiáng)人才培養(yǎng)主體意識(shí)，主動(dòng)融入企業(yè)發(fā)展的產(chǎn)業(yè)價(jià)值鏈中，才能尋求到校企的利益合作點(diǎn)。所以，“企業(yè)+責(zé)任班”模式的實(shí)施是以學(xué)校增強(qiáng)人才培養(yǎng)主體意識(shí)為前提的。
第二，“企業(yè)+責(zé)任班”模式實(shí)現(xiàn)全方位工學(xué)結(jié)合分析?！捌髽I(yè)+責(zé)任班”模式，根據(jù)某主體崗位專(zhuān)業(yè)群，優(yōu)選在專(zhuān)業(yè)細(xì)分下具有某項(xiàng)核心競(jìng)爭(zhēng)力的企業(yè)合作，企業(yè)在人才培養(yǎng)中主要起到職業(yè)技能和崗位能力培養(yǎng)作用。合作企業(yè)可以是時(shí)段性的，可以是一家或多家。這種模式中，學(xué)校是主動(dòng)適應(yīng)人才市場(chǎng)需求的主體，主動(dòng)整合校企資源，依托企業(yè)引入項(xiàng)目，責(zé)任教師等校內(nèi)教學(xué)團(tuán)隊(duì)培養(yǎng)企業(yè)要求人才，為企業(yè)提供人才服務(wù)，校企是利益的共同體。所以，共享校企資源，解決辦學(xué)規(guī)模與辦學(xué)條件瓶頸問(wèn)題，全方位工學(xué)結(jié)合提升人才培養(yǎng)質(zhì)量是順理成章的結(jié)果。
[關(guān)鍵詞]MMP_2；MMP_9；TIMP_1；血管平滑肌細(xì)胞；增殖；遷移；阿齊沙坦
中圖分類(lèi)號(hào)：R544.1文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A文章編號(hào)：1009_816X（2014）04_0274_04
[Abstract] Objective To investigate the effects of azilsartan on TGF_β_induced spontaneously hypertensive vascular smooth muscle cells （VSMCs） proliferation and migration. Methods Rat VSMCs were cultivated by the method of tissue explants adherence. Cells of generation 3 to 5 were used as the experimental system. The MTT test was used to measure cell proliferation and Boyden chamber assay was used to measure cell migration. Primary cultured VSMCs were treated by 10 ng/ml TGF_β and azilsartan for 24 hours. The expression of MMP_2， MMP_9， TIMP_1 were measured by Western blot and RT_PCR. Results The expression of MMP_2， MMP_9 and TIMP_1 in rat VSMCs stimulated by TGF_β increased significantly. VSMCs migration and proliferation also increased significantly. Azilsartan significantly inhibited TGF_β induced MMP_2， MMP_9 and TIMP_1 production in rat VSMCs， as well as VSMCs proliferation and migration. Conclusions Azilsartan inhibited TGF_β_induced VSMCs proliferation and migration by down_regulation the expression of MMP_2， MMP_9， TIMP_1.
[Key words] MMP_2； MMP_9； TIMP_1； Vascular smooth muscle cells ；Proliferation； Migration； Azilsartan
自發(fā)性高血壓是最常見(jiàn)的心血管疾病，以體循環(huán)動(dòng)脈壓升高為主要特點(diǎn)。高血壓伴發(fā)的血管重構(gòu)包括血管壁腔比增加、小動(dòng)脈稀少及血管功能異常?；|(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMPs）是參與降解全身各種組織細(xì)胞外基質(zhì)（extracellular matrix，ECM）的蛋白酶家族，參與正常和病理?xiàng)l件下的組織重構(gòu)，金屬蛋白酶組織抑制物（TIMP）是MMPs的特異性抑制物[1]。MMPs/TIMP的動(dòng)態(tài)改變，造成選擇性的降解ECM，從而調(diào)整血管內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)、生長(zhǎng)和成活[2]。血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑可能是通過(guò)抑制局部腎素血管緊張素醛固酮系統(tǒng)（RAS）活性和緩激肽的降解來(lái)抑制或逆轉(zhuǎn)血管重構(gòu)[3]。阿齊沙坦是一種血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑，多用于治療高血壓病[4]。但沙坦類(lèi)藥物是否可抑制血管平滑肌細(xì)胞（vascular smooth muscle cells，VSMCs）中MMPs/TIMP的表達(dá)則鮮有報(bào)道。通過(guò)藥物抑制MMPs/TIMP活性，減少細(xì)胞外基質(zhì)的降解，阻止血管平滑肌細(xì)胞的增殖和遷移是防治高血壓發(fā)生、發(fā)展的一個(gè)可能的切入點(diǎn)。本研究觀察血管緊張素Ⅱ受體拮抗劑阿齊沙坦對(duì)血管平滑肌細(xì)胞中MMP_2、MMP_9和TIMP_1蛋白表達(dá)的影響，探討轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子_β（TGF_β）在自發(fā)性高血壓大鼠發(fā)生、發(fā)展進(jìn)程中誘導(dǎo)細(xì)胞外MMPs/TIMP分泌及促平滑肌細(xì)胞遷移、增殖能力，為臨床應(yīng)用阿齊沙坦治療高血壓提供指導(dǎo)信息。
1資料和方法
1.1材料：自發(fā)性高血壓大鼠（SHR）和同一株系的正常血壓大鼠（WKY）大鼠（購(gòu)自上海第二醫(yī)科大學(xué)附屬瑞金醫(yī)院高血壓研究所），雄性，7～10周齡。血壓：SHR>170mmHg（1mmHg=0.113kPa），WKY
1.2實(shí)驗(yàn)分組：將大鼠斷頭處死，無(wú)菌情況下分離胸主動(dòng)脈，剪碎后加入含有20%胎牛血清的DMEM培養(yǎng)液，用貼壁細(xì)胞培養(yǎng)法行原代細(xì)胞培養(yǎng)至細(xì)胞長(zhǎng)成致密單層后傳代，取3～5代細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)。在傳代過(guò)程中，細(xì)胞以5×105個(gè)/ml接種于6孔板培養(yǎng)板上。實(shí)驗(yàn)前48h換成不含血清的DMEM，使細(xì)胞處于靜止?fàn)顟B(tài)。將培養(yǎng)的VSMC分成6組：WKY組、SHR組；TGF_β刺激WKY組、TGF_β刺激SHR組：10ng/ml TGF_β誘導(dǎo)增殖；TGF_β刺激WKY組阿齊沙坦給藥組、TGF_β刺激SHR組阿齊沙坦給藥組：50μmol/ml阿齊沙坦預(yù)處理30min后，用10ng/ml TGF_β誘導(dǎo)增殖。各組均應(yīng)用0.2%胎血清培養(yǎng)液培養(yǎng)，培養(yǎng)24h后收集細(xì)胞。
1.3MTT法檢測(cè)阿齊沙坦對(duì)TGF_β誘導(dǎo)的VSMCs細(xì)胞增殖的作用：取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，以每孔3×104/孔均勻接種于96孔培養(yǎng)板內(nèi)，按照上述分組方法將各組細(xì)胞懸液接種于96孔板上，培養(yǎng)24h后，結(jié)束實(shí)驗(yàn)，將每孔的培養(yǎng)液吸出，重新加入180μl培養(yǎng)液，然后每孔加入濃度為5mg/ml的MTT液20μl。在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)4h后，吸取培養(yǎng)液，每孔加入DMSO 200μl振蕩10min，用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在490nm波長(zhǎng)測(cè)定各孔A值，取每組3孔的均值。
1.4Boyden趨化小室檢測(cè)阿齊沙坦對(duì)TGF_β誘導(dǎo)的VSMCs細(xì)胞遷移的影響：取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的VSMCs，將培養(yǎng)的VSMCs分成6組觀察VSMCs遷移：WKY組、SHR組：上室中加入未經(jīng)處理的VSMCs懸液，下室中加人DMEM；TGF_β刺激WKY組、TGF_β刺激SHR組：上室中加入未經(jīng)處理的VSMCs懸液，下室中加入10ng/ml TGF_β 0.5ml；TGF_β刺激WKY組阿齊沙坦給藥組、TGF_β刺激SHR組阿齊沙坦給藥組：上室中加入50μmol/ml阿齊沙坦孵育2h的VSMCs懸液，下室中加入10ng/ml TGF_β 0.5ml。上、下室之間隔以8μm孔徑聚碳酸酯濾膜。將建立好的Boyden小室放入一容器培養(yǎng)24h后取出濾膜，固定、染色，在高倍鏡下（×400）隨機(jī)觀察6個(gè)視野，計(jì)數(shù)移行細(xì)胞數(shù)，取平均值。
1.5Western blot檢測(cè)蛋白表達(dá)：取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞，0.05%胰蛋白酶消化，PBS洗滌兩次后離心棄上清，加入含全酶抑制劑和PMSF的RIPA裂解液冰浴裂解提取總蛋白。BCA法測(cè)定樣品蛋白濃度，完成十二磺基硫酸鈉/聚丙烯酸胺凝膠電泳和蛋白轉(zhuǎn)膜操作，膜片分別與一抗（抗MMP_2多克隆抗體、抗MMP_9多克隆抗體、抗TIMP_1多克隆抗體）進(jìn)行抗原抗體結(jié)合反應(yīng)，再與辣根酶標(biāo)記二抗反應(yīng)，經(jīng)適當(dāng)洗滌，膜片與ECL溫浴1min，保鮮膜包裹后，經(jīng)X光片曝光，顯影和定影，最后對(duì)結(jié)果進(jìn)行光密度掃描分析。
1.6RNA的提取及RT_PCR檢測(cè)m_RNA表達(dá)：以Trizol提取細(xì)胞總RNA，按照試劑盒要求操作。MMP_2上游引物序列：5’_GCGACAAGAAGTATGGCTTC_3’，下游引物序列：5’_TGCCAAGGTCAATGTCAGGA_3’；MMP_9上游引物序列：5’_CGCAGACATCGTCATCCAGT_3’，下游引物序列：5’_GGATTGGCCTTGGAAGATGA_3’；TIMP_1上游引物序列：5’_CAATTCCGACCTCGTCATCA_3’，下游引物序列：5’_TCAGAGCCTTGGAGGAGCT_3’，按實(shí)驗(yàn)室常規(guī)方法進(jìn)行PCR擴(kuò)增。用反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)液2μl作為模板，加入2μl上游及下游引物和2μl Taq酶后用PCR儀擴(kuò)增。循環(huán)步驟如下：變性94℃ 1min，58℃ 1min和72℃ 1min共35個(gè)循環(huán)；末次長(zhǎng)7min，終止反應(yīng)。以β_actin為內(nèi)參，依據(jù)2_ΔΔCT法計(jì)算各組細(xì)胞mRNA的相對(duì)表達(dá)量。
1.7統(tǒng)計(jì)學(xué)處理：以SPSS16.0統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，計(jì)量資料用（x-±s）表達(dá)，組間比較采用t檢驗(yàn)分析，P
2結(jié)果
2.1MTT法檢測(cè)TGF_β對(duì)VSMCs細(xì)胞的增殖作用：見(jiàn)圖1。MTT法檢測(cè)結(jié)果如圖所示：SHR和WKY組VSMCs，TGF_β刺激組細(xì)胞增殖水平均顯著高于對(duì)照組和TGF_β+阿齊沙坦給藥組（P0.05）。另外，SHR組VSMCs細(xì)胞增殖水平均顯著高于相同干預(yù)的WKY（#P
圖1各組大鼠VSMCs細(xì)胞增殖水平的比較
2.2阿齊沙坦對(duì)TGF_β誘導(dǎo)的VSMCs細(xì)胞遷移的影響：見(jiàn)圖2。與WKY組相比，SHR組細(xì)胞遷移數(shù)目明顯增多（#P
圖2阿齊沙坦對(duì)TGF_β誘導(dǎo)的VSMCs細(xì)胞遷移的影響2.3各組VSMCs中MMP_2、MMP_9、TIMP_1蛋白水平比較：Western blot檢測(cè)結(jié)果如圖3所示：SHR和WKY組VSMCs，TGF_β刺激組MMP_2、MMP_9和TIMP_1蛋白表達(dá)水平均高于對(duì)照組和TGF_β+阿齊沙坦給藥組（P0.05）。各組SHR大鼠VSMCs中MMP_2、MMP_9和TIMP_1蛋白表達(dá)水平均顯著高于相同干預(yù)的WKY大鼠（P
圖3MMP_2、MMP_9和TIMP_1在各組細(xì)胞中的蛋白的表達(dá)
2.4各組VSMCs中MMP_2、MMP_9、TIMP_1 mRNA水平比較：RT_PCR檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)圖4。SHR和WKY組VSMCs，TGF_β刺激組MMP_2、MMP_9和TIMP_1 mRNA表達(dá)水平均高于TGF_β+阿齊沙坦給藥組（*P
